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培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。培養...
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細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。(由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系),因此,細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞(特定環境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細胞。經過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機的細胞,稱之為細胞系。如細胞系的生存期有限,則稱之為有限細胞系;已獲無限繁殖能力的細胞系,稱連續或無限細胞系。無限細胞系大多已發生異倍化,具異倍體核型,可能成為惡性細胞,因此本質上已是發生轉化的細胞系。無限細胞系有永...
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NK細胞分型標志物自然殺傷細胞(Naturalkiller,NK)是細胞毒性淋巴細胞的一種類型,是天然免疫系統的主要組成部分。NK細胞在腫瘤和病毒感染細胞的宿主排斥反應中起重要作用。它們之所以被命名為“Naturalkiller”,是因為初認為它們不需要激活就能殺死“缺失自我識別”的細胞(“缺失自我識別”是用來描述MHC-I類細胞表面標記表達水平較低的細胞,這種情況可能是由病毒感染引起的,或者是在殺傷T細胞的強選擇壓力下發生的)。NK細胞與ILC1s(1型天然淋巴細胞)具有許...
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細胞系作為正常或腫瘤組織的模式細胞被廣泛應用于科學研究和藥物開發,然而很大一部分的細胞系被錯誤標記或被其它個體、組織、種系來源的細胞所替代。當一個細胞系建成后,中國常通過組織專家開鑒定會的形式予以鑒定,從學術角度考慮,此舉實非必要。按慣例,只要研究認真負責地把有關資料在雜志或刊物上報道,詳細介紹上述各項目即可。以前因未建立統一的細胞庫時,對已建立的細胞系多由作者單位自行保管,有浪費人力、交流使用不便、細胞易污染和丟失等弊病。我國已初建成小規模貯存細胞機構,待獲進一步發展,這對...
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重組蛋白其獲得途徑可以分為體外方法和體內方法。兩種方法的前提都是應用基因重組技術,獲得連接有可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體,之后將其轉入可以表達目的蛋白的宿主細胞從而表達特定的重組蛋白分子。當前重組蛋白的生產主要有四大系統;1.原核表達系統:常用的大腸桿菌蛋白表達,真核表達系統如酵母,哺乳動物細胞蛋白表達(常用的細胞CHO,HEK293)及、昆蟲細胞蛋白表達系統。重組蛋白的產生尚可利用轉基因動物的乳腺或者植物產生,產生的重組蛋白作為生物制藥的產物,在醫學中作用顯著。利...
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菌種的有效保存用于發酵過程作為活細胞催化劑的微生物,包括細菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類。來源于自然界大量的微生物,從中經分離并篩選出有用菌種,再加以改良,貯存待用于生產。使優良菌種的性狀保持穩定,人為地創造條件,使菌種的新陳代謝活動處于不活潑狀態,即選取優良菌種的休眠體(孢子或芽孢)或富有生命力的懸浮液在低溫或脫水狀態下保存。脫水存法1.沙土保存法,能產孢子的細菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內,裝置高度為1cm;滅...
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重組蛋白的產品介紹重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。體外重組蛋白的生產主要包括四大系統:原核蛋白表達,哺乳動物細胞蛋白表達,酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。生產的蛋白在活性和應用方法方面均有所不同。根據自身的下游運用選擇合適的蛋白表達系統,提高表達成功率。以利用轉基因動物的乳腺表達重組蛋白為例:其方法是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起,通過顯微注射等方法,導入哺乳動物(哺乳動物才會泌乳)的受精卵中,然后,將受精卵送入母...
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細胞培養基的基本介紹合成培養基。合成培養基的種類相當多。合成培養基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養中使用的基礎合成培養基還必須加入一定量的天然培養基成分,以克服合成培養基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養產物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大...