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一、一抗選擇需要確定或參考的信息(一)目的蛋白的信息確定想檢測(cè)的目的蛋白是否與抗體識(shí)別蛋白信息吻合,注意中英文名字、別名等信息。某些蛋白具有多種不同的亞型,這需要在選擇抗體之前確定要研究的蛋白亞型。還有些抗體由于其抗原選擇的是不同蛋白亞型共有的肽段區(qū)域,是可以同時(shí)識(shí)別多個(gè)亞型的。有的蛋白通過(guò)剪切加工才能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓幕钚孕问剑鏑aspase、Insulin等,這就需要根據(jù)研究需要,選擇針對(duì)前體或成熟形式的特異性抗體。(二)抗體制備所用抗原的信息抗體是由各種不同抗原免疫宿主而制...
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技術(shù)講堂—抗體相關(guān)知識(shí)(1)抗體(antibody)是生物體在抗原物質(zhì)刺激下,由B細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白(Ig)。按抗體的來(lái)源,可將其分為天然抗體和人工制備的抗體,是通過(guò)對(duì)特定生物體免疫接種特定抗原物質(zhì)后而獲得。人工免疫動(dòng)物制備的抗體應(yīng)用甚為廣泛,既可以用于科學(xué)研究,也可以用于疾病的預(yù)防、診斷和治療。一、抗體的基本結(jié)構(gòu)經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),抗體Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型...
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培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要,添加一些自身無(wú)法合成的化合物,即生長(zhǎng)因子。有些微生物,如自養(yǎng)型微生物,不需要碳源,所以上述物質(zhì)只具有一般性。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基,較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在...
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酶聯(lián)免疫試劑盒的簡(jiǎn)單介紹目前ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)方法已被廣泛應(yīng)用于多種細(xì)菌和病毒等疾病的診斷。在動(dòng)物檢疫方面,ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的標(biāo)準(zhǔn)方法。自從Engvall和Perlman(1971)報(bào)道建立ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssays,ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),...
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菌種在使用和傳代過(guò)程中容易發(fā)生污染、變異甚至死亡,因而常常造成菌種的衰退,并有可能使優(yōu)良菌種丟失。菌種保藏的重要意義就在于盡可能保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定,確保菌種不死亡、不變異、不被污染,以達(dá)到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。菌種保藏是將微生物菌種采用適宜的方法妥善保藏,避免其死亡、污染,并保持其原有性狀基本穩(wěn)定的一種實(shí)驗(yàn)方法,也是微生物實(shí)驗(yàn)室極為重要的一項(xiàng)基礎(chǔ)性工作。甘油冷凍保藏菌種是目前實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用為廣泛的一種的菌種保藏方法,原理是以甘油為保護(hù)劑,低溫冷凍條件下,使微...
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培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、碳源、生長(zhǎng)因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管,均改制成粉末。培養(yǎng)...
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細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。(由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系),因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞(特定環(huán)境下口語(yǔ)和書(shū)面語(yǔ)都使用),廣義是指可傳代的細(xì)胞。經(jīng)過(guò)40-50次分裂的渡過(guò)第二次死亡危機(jī)的細(xì)胞,稱之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限,則稱之為有限細(xì)胞系;已獲無(wú)限繁殖能力的細(xì)胞系,稱連續(xù)或無(wú)限細(xì)胞系。無(wú)限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化,具異倍體核型,可能成為惡性細(xì)胞,因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無(wú)限細(xì)胞系有永...
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NK細(xì)胞分型標(biāo)志物自然殺傷細(xì)胞(Naturalkiller,NK)是細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞的一種類型,是天然免疫系統(tǒng)的主要組成部分。NK細(xì)胞在腫瘤和病毒感染細(xì)胞的宿主排斥反應(yīng)中起重要作用。它們之所以被命名為“Naturalkiller”,是因?yàn)槌跽J(rèn)為它們不需要激活就能殺死“缺失自我識(shí)別”的細(xì)胞(“缺失自我識(shí)別”是用來(lái)描述MHC-I類細(xì)胞表面標(biāo)記表達(dá)水平較低的細(xì)胞,這種情況可能是由病毒感染引起的,或者是在殺傷T細(xì)胞的強(qiáng)選擇壓力下發(fā)生的)。NK細(xì)胞與ILC1s(1型天然淋巴細(xì)胞)具有許...
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