ELISA檢測(cè)試劑盒在的實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法、雙位點(diǎn)一步法、捕獲法測(cè)IgM抗體、應(yīng)用親和素和生物素的ELISA。在今天的技術(shù)內(nèi)容中，為您詳解ELISA方法設(shè)計(jì)的原理根據(jù)。
ELISA檢測(cè)試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此計(jì)劃，則棄去，算了另兩個(gè)陰性對(duì)照從頭核算NCX；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上計(jì)劃，則該次試驗(yàn)無(wú)效。在條件許可下，應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值，這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。現(xiàn)舉某種檢查ELISA檢測(cè)試劑盒為例,先讀出標(biāo)本、陽(yáng)性對(duì)照（P）、和陰性對(duì)照（N）的吸光值，然后進(jìn)行核算。核算方法有多種，大致可分為陽(yáng)性斷定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類。陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。
夏天正在進(jìn)行中，溫度還是很熱，ELISA檢測(cè)試劑盒也是要好好保存，這樣才不會(huì)影響ELISA檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用功能。那么ELISA檢測(cè)試劑盒要怎樣保存？
1．ELISA檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗刷液可能會(huì)有結(jié)晶分出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗刷時(shí)不影響成果。
3．各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器，并常常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)刻好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦運(yùn)用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的一起做規(guī)范曲線，好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，核算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5．封板膜只限一次性運(yùn)用，以避免穿插污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
ELISA檢測(cè)試劑盒快遞路上3-7天是無(wú)任何質(zhì)量問(wèn)題的，提示客戶，拿到所購(gòu)產(chǎn)品時(shí)請(qǐng)放置供給的試劑盒保存：-20℃；2-8℃(頻頻運(yùn)用時(shí))
